Rapport de stage d'internat de pharmacie au service d'immunologie

Extraits

[...] La présence d'agglutinats dans l'une des cupules traduit la présence d'agglutinines irrégulières dans le sérum testé correspondant, et le test devra être refait en utilisant d'autres hématies. Le titre est exprimé en UI/ml en se référant aux résultats obtenus avec le sérum standard. Les valeurs normales sont inférieures à 6UI/ml. REACTION DE WAALER ROSE EN MICROMETHODE 1/4 INCUBER 1 HEURE A L'ETUVE 37°c FAIRE UNE 1ère LECTURE INCUBER UNE NUIT A +4°c FAIRE UNE 2ème LECTURE GRS = globules rouges sensibilisées. [...]

[...] ➢ Réactif de coloration : Dissoudre 125mg de bleu de Coomassie brillant G250 dans 40ml de méthanol absolu. Puis, rajouter successivement : ➢ Acide orthophosphorique à 85% 100ml ➢ Eau distillée 800ml ➢ Dodecylsulfate de sodium (SDS) 30mg ➢ Compléter alors le volume à 1.000 ml avec de l'eau distillée. Le réactif ainsi préparé doit être conservé en flacon de polyéthylène et à l'abri de la lumière. Dans ces conditions, il demeure stable pendant 6 mois Mode opératoire : Les 4 solutions étalons ainsi que les échantillons à doser sont testés en duplicata dans les cuves de la microplaque selon le protocole suivant : ➢ Solution étalon ou échantillon à doser 10mcl ➢ Réactif de coloration 200mcl Incuber 5mn à température du laboratoire, puis lire à 620nm à l'aide d'un lecteur de microplaques. [...]

[...] - Alpha1 antitrypsine : Diminution dans : les troubles pulmonaires : emphysème, troubles hépatiques : cirrhose mortelle. - Hépatoglobine : Augmentation : meilleur élément du syndrome inflammatoire. Diminution : cause de l'hémolyse. - Ceruléoplasmine : Augmentation : peu d'intérêt. Diminution : maladie de Wilson (maladie métabolique du cuivre) ; hypercupriurie, hypocuprémie : cirrhose, dégénérescence cervicale, insuffisance rénale, anneau péricornéen. alpha 2 : - alpha 2 macroglobuline : Augmentation : syndrome néphrotique. Bêta globulines : Transférine : Sidérophilline : Augmentation dans carence martiale ou anémie, par carence en fer ou hémorragie aiguë. [...]

[...] Ce réactif est déposé sur le prélèvement issu du patient. On peut effectuer une « immunofluorescence directe » en utilisant un anticorps couplé avec un fluorochrome ou bien une « immunofluorescence indirecte » en utilisant un anticorps secondaire couplé à fluorochrome, cet anticorps reconnaît l'anticorps primaire qui est spécifique à la protéine d'intérêt. Il est ensuite rincé (le rinçage emporte des substances qui ne sont pas fixées). Si le prélèvement ne contient pas l'antigène, l'observation est négative. Si l'on est en présence d'un antigène, l'observation au microscope montre une fluorescence sous la forme de petites taches ou de bâtonnets, en fonction de la structure de l'antigène en évidence. [...]

[...] Transférer le lysat dans un micro-tube de 1,5 ml et faire bouillir 5 minutes de plus. Passer aux ultrasons brièvement ou passer plusieurs fois à travers une aiguille de gauge 26 et centrifuger 5 minutes. Le lysat obtenu est un «lysat cellulaire total (dénaturé). Les deux méthodes de fixation suivantes permettent une rapide évaluation de la distribution cellulaire d'un antigène particulier : Méthanol/acétone : cultivez les cellules sur des lamelles de verre. Fixez et perméabilisez les par immersion pendant 10 minutes dans un mélange acétone/éthanol Laissez sécher à l'air. [...]